치료용 IVT mRNA의 주요 특징
변형된 리보뉴클레오티드를 함유하고 있다는 것인데, 이는 선천성 면역원성을 감소시키고 mRNA 안정성을 추가로 증가시킬 수 있으며, 이 두 가지 모두 mRNA 치료에 유리한 특성입니다1,2,3,4,5. 예를 들어, 임상적으로 승인된 SARS-CoV-2 mRNA 백신에는 N이 포함되어 있습니다1-메틸슈도우리딘(1-methylΨ)은 IVT mRNA 선천성 면역원성을 감소시키는 것으로 나타났습니다.3,4,5. 5-메틸시티딘(5-methylC)과 같은 일부 변형된 리보뉴클레오티드는 진핵생물에서 자연적으로 발생하는 전사 후 mRNA 변형인 반면, 1-methylΨ와 같은 다른 변형은 그렇지 않습니다. 6,7,8,9,10).
5-메톡시우리딘(5-methoxyU), 5-methylC 및 1-methylΨ가 IVT mRNA의 번역에 어떤 영향을 미치는지 조사했습니다. 5-methoxyU, 5-methylC 및 1-methylΨ는 IVT mRNA에서 시험관 내 재조합 단백질 합성을 증가시키기 위해 사용되어 왔으며 IVT mRNA 기반 치료제에 대한 전임상 개념 증명에 사용되었습니다11,12년. 앞서 언급했듯이 1-methylΨ는 허가된 IVT mRNA 기반 SARS-CoV-2 백신뿐만 아니라 개발 중인 mRNA 기반 인간 백신 및 치료제에 통합된 리보뉴클레오티드입니다2,13,14년.
리보뉴클레오티드의 광범위한 사용에도 불구하고, 리보뉴클레오티드 변형이 단백질 합성에 어떤 영향을 미치는지, 특히 치료용 IVT mRNA의 번역에 어떤 영향을 미치는지에 대해서는 놀랍게도 알려진 바가 거의 없습니다. 우리는 변형된 리보뉴클레오티드가 여러 가지 이유로 mRNA 번역의 충실도에 어떤 영향을 미치는지에 관심이 있었습니다. 특정 리보뉴클레오티드 변형은 mRNA 서열(예: 이노신)을 다시 코딩할 수 있습니다.15). 5-methylC는 이전에 원핵생물에서 mRNA 번역 중 오독을 증가시키는 것으로 나타났지만 진핵생물 mRNA 번역 충실도에 미치는 영향은 탐구되지 않았습니다16. 번역 충실도에 대한 5-methoxyU의 영향은 조사되지 않았습니다. 슈도우리딘(Ψ)은 진핵생물에서 mRNA 정지 코돈의 오독을 증가시키는 것으로 알려져 있으며, 원핵생물 mRNA 번역 중 오독에 영향을 미칠 수 있습니다16,17,18년. 1-methylΨ는 코돈 오독에 영향을 미치지 않는 것으로 보이지만 mRNA의 단백질 합성 속도 및 리보솜 밀도에 영향을 미치는 것으로 나타나 mRNA 번역에 직접적인 영향을 미치는 것으로 나타났습니다19,20년.
현재 어떤 변형된 리보뉴클레오티드가 mRNA 번역 충실도에 영향을 미치는지는 불분명하며, 기존 연구는 대부분 주어진 코돈에서만 오독 주파수를 이해하는 데 국한되어 있습니다. mRNA 코돈의 오독은 또한 폴리펩티드 서열을 변경할 수 있는 전사 후 메커니즘의 한 유형일 뿐입니다. 지금까지 변형된 리보뉴클레오티드가 합성 전사체를 번역하는 동안 올바른 판독 프레임의 유지에 영향을 미칠 수 있는지에 대한 근본적인 질문을 조사한 연구는 없었습니다. 이러한 과정을 이해하는 것은 일반적으로 변형된 mRNA의 단백질 합성에 대한 지식을 늘리는 데 중요하지만, 매우 다양한 RNA 염기서열 또는 치료 맥락에서 변형된 리보뉴클레오티드를 사용하는 새로운 mRNA 기반 치료제의 견고한 설계 및 평가에도 필수적입니다.
리보뉴클레오티드 변형이 mRNA 번역 중 판독 프레임 유지에 어떤 영향을 미치는지 조사하기 위해 프레임 밖 단백질 합성을 보고하는 IVT mRNA(Fluc+1FS)를 설계하고 합성했습니다(그림 1). 1a). Fluc+1FS mRNA는 반딧불이 루시페라아제(NFluc)의 아미노 말단 세그먼트와 플루크(CFluc)의 상보적인 카르복시 말단 세그먼트를 직접 다운스트림으로 인코딩합니다. CFluc은 +1 판독 프레임으로 인코딩됩니다. Fluc+1FS mRNA는 정상적으로 번역될 때 촉매적으로 비활성(잘린) NFluc을 생성하도록 설계되었습니다. 그러나 번역 중에 리보솜이 프레임 밖으로 이동하면 프레임 내 NFluc 및 프레임 외 CFluc 모두의 잔기를 포함하는 길쭉한 폴리펩티드가 생성될 수 있으며, 이는 촉매 활성을 증가시킬 수 있습니다.
코로나 예방접종의 부작용
한마디로 코로나 예방주사을 맞으면 돌연변이 단백질이 형성되어 한방에 훅 갈 수 있다는 내용이고 위에 내용은 세계적으로 유명한 네이쳐에 실림.
https://www.nature.com/articles/s41586-023-06800-3
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